
一、引言
前不久,听到有从业人员说,流感嗜血杆菌不是苛养性细菌。闻听此言,先是意外再感无语。因为这是一个并不深奥难懂的知识点,无论专业国际资料,还是国内教材书本,甚至网上也能搜到流感嗜血杆菌的相关知识。
二、认识流感嗜血杆菌
在临床微生物检验中,颈部以上部位感染,都有流感嗜血杆菌分离的可能。呼吸道感染标本,尤其是痰标本,是常规做流感嗜血杆菌分离培养的一类标本。其他标本,如五官科分泌物,也大多需要考虑流感嗜血杆菌感染的可能性。
痰培养,在《全国临床检验操作规程》所写的标本接种环节中,需要接种血平板,麦康凯平板,嗜血型巧克力平板。其中,嗜血型巧克力平板,用于流感嗜血杆菌的分离培养。且该平板,需放置二氧化碳培养箱进行分离培养。不单要专用平板,也要专用培养箱。除此之外,培养箱还需配置适宜的生长温度和二氧化碳气体浓度进行分离培养。在陈东科、孙长贵主编的《实用临床微生物学检验与图谱》一书中,流感嗜血杆菌列于第十八章苛养性细菌第一节嗜血杆菌属。因其生长需同时依赖X因子(氯化高铁血红素)、V因子(NAD,辅酶Ⅰ或二磷酸吡啶核苷酸),且生长环境要求气体中二氧化碳浓度达到5%~10%,才能良好生长(普通大气环境生长缓慢或不生长)。国内资料、教材和国际参考书《临床微生物学手册》,都把流感嗜血杆菌列属于苛养性细菌部分。在各级实验室间质量评价中,对实验室是否配备二氧化碳孵箱,能否培养分离出嗜血杆菌属细菌,也作为一项评价实验室能力的指标。医保收费条目中,流感嗜血杆菌的培养收费也有专用收费项目代码。
倪宇星、尚红主编《临床微生物学检验》教材第五版中,流感嗜血杆菌列于第十章第一节嗜血杆菌属,隶属于巴斯德菌科。属内共17个种,流感嗜血杆菌位于与临床相关的9个种中。该菌属于革兰氏阴性短小球杆菌,无芽孢鞭毛,多数菌株有荚膜。依据荚膜多糖抗原分为a~f6个血清型,其中以b型(Hib)毒力为最强(为儿童侵袭性感染主要致病菌),f型毒力为次。其主要致病物质为荚膜、菌毛、内毒素。致病力强的菌株可产IgA蛋白酶,荚膜为主要毒力因子。主要引起原发化脓性感染及继发性感染,包括脑膜炎、鼻咽炎、关节炎、心包炎、鼻窦炎及中耳炎。为需氧或兼性厌氧。流感嗜血杆菌生长营养要求苛刻,必须依赖X因子(氯化高铁血红素)、V因子(NAD,辅酶Ⅰ或二磷酸吡啶核苷酸)才能生长。血细胞中含此二种因子,但V处于抑制状态(80~90℃,5~15分钟可释放),故在血平板基础上制成巧克力色琼脂培养基,并加入万古霉素抑制其他阳性菌生长,以提高培养流感嗜血杆菌的成功率。该平板上,流感嗜血杆菌培养后,形成灰白色、圆形、光滑半透明小菌落。该菌属需氧或兼性厌氧菌,最适生长温度35~37℃,需配置5%~10%二氧化碳环境。该菌可正常菌群寄居于人类上呼吸道,宿主免疫力低下即可引发感染。其传播途径以呼吸道飞沫传播为主,也可以通过密切接触、母婴垂直途径等传播。传染源为患者或无症状携带者。易感人群为5岁以下(尤以2月龄~2岁)、老年人、免疫功能低下人群、慢性呼吸道疾病患者、糖尿病等基础病患者以及脾切除术后和使用免疫抑制剂人群。属于典型的苛养性细菌。
三、流感嗜血杆菌培养的临床价值
流感嗜血杆菌的分离培养,是诊断该菌感染的金标准。临床微生物检验专业从一开始,就形成了痰培养常规分离流感嗜血杆菌这一共识。及时有效的分离确诊,给临床治疗流感嗜血杆菌的感染提供了有力的证据。在各级综合医院中,痰标本都是送检量排前几位的微生物检验标本,每年流行季都能分离到大量的流感嗜血杆菌。
四、后记
现代医学是以循证医学理念为导向,抗感染治疗尤其需要病原学证据的支持印证。相关从业者,应该掌握必要的微生物知识,为临床为患者服务,切不可一知半懂,更不可以误传人。
作者:乐山市沙湾区人民医院 李飞